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石蠟microRNA熒光定量PCR檢測

發布時間:2021/09/24
石蠟microRNA熒光定量PCR檢測

  實驗介紹microRNA 長度大約在22nt左右,相對比較穩定,使檢測石蠟組織中microRNA的表達成為可能,據研究表明,石蠟組織與新鮮組織中的microRNA表達水平相似,石蠟組織中的microRNA表達檢測與其保存時間的長短沒有太大關系,可以使研究的樣本來源進一步豐富,特別是珍貴性的樣本來源。

 

  我們通過不斷改進與摸索建立了一個比較成熟的石蠟組織microRNA實驗體系,包括提取、RNA的嚴格質控、定量,可以為研究人員提供可靠的microRNA定量檢測實驗技術服務

 

  交付結果:實驗報告、樣本返還

 

  質量保證:客觀、公正、可信數據結果

 

  交付時間:大約5-10個工作日(根據預實驗、樣本數量情況決定)

 

  服務項目

 

  服務流程1、 依據客戶提供的基因ID或基因名稱設計合成引物(含驗證)

 

  2、 標準品制備:只針對于絕對定量,相對定量多種內參可供選擇(如:U6,miR16等)

 

  3、 RNA提取及RNA質量分析:采用Invitrogen的TRIzol 進行裂解提取,RNA提取質量有瓊脂糖凝膠電泳及分光光度計雙重質控

 

  4、 逆轉錄:嚴格按照fermentas的反轉錄試劑盒要求抽取質控合格的RNA,并且使用基因特異性引物進行反轉錄,以最大程度的確保反轉錄酶的反轉效率

 

  5、 預實驗驗證樣品和引物:依據客戶選定內參及基因,對客戶全部樣本內參及個別樣本基因進行驗證,以確保樣本的反轉錄情況及基因的設計

 

  6、 正式實驗:在以上所有質控合格的情況下,每個樣本每個基因進行四個復孔的重復檢測,確保至少提供三個復孔Ct≤0.5的數據

 

  7、 實驗報告:提供詳細的實驗報告,包括RNA提取電泳圖、擴增曲線、溶解曲線及數據結果分析

 

  樣本要求石蠟切片(≥10張):厚度10-20μm,石蠟組織塊或固定組織均可

 

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